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Immagine in primo piano della Taq DNA polimerasi HC1013A di Superstart
  • Superstart Taq DNA Polimerasi HC1013A

Superstart Taq DNA polimerasi


N. cat.: HC1013A

Confezione: 0,1 ml/1 ml/5 ml

Superstart Taq DNA Polymerase è una DNA polimerasi hot start.

Descrizione del prodotto

Dettagli del prodotto

Superstart Taq DNA Polymerase è una DNA polimerasi hot start.Questo prodotto non solo può inibire meglio la reazione non specifica causata dalla ricottura non specifica dei primer o dall'aggregazione dei primer nel processo di preparazione e amplificazione del sistema PCR.Pertanto, può ottenere risultati migliori nell'amplificazione multipla.Inoltre, può ottimizzare l'amplificazione di modelli a bassa concentrazione per ottenere una quantità maggiore di prodotto e ottenere un effetto di amplificazione più stabile ed estremo.


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  • Componenti

    1.5 U/μL Superstart Taq DNA polimerasi

    2.10 × PCR Buffer II (Mg²+ libero) (opzionale)

    3.MgCl 25 mM2(opzionale)

    * 10 × PCR Buffer II (Mg²+ libero) non contiene dNTP e Mg²+, aggiungere dNTP e MgCl2durante la preparazione del sistema di reazione.

     

    Applicazioni consigliate

    1.Rilevazione della peste suina africana.

    2.Rilevamento delle malattie sessualmente trasmissibili.

    3.Amplificazione multiplex.

     

    Condizioni di conservazione

    -20°C per la conservazione a lungo termine, deve essere miscelato bene prima dell'uso, evitare frequenti congelamenti e scongelamenti.

    *Se si verificano precipitazioni dopo la refrigerazione, è normale;si consiglia di equilibrare a temperatura ambiente prima della miscelazione e dell'uso.

     

    Definizione di unità

    Un'unità attiva (U) è definita come la quantità di enzima che incorpora 10 nmol di desossiribonucleotide in materiale insolubile in acido a 74°C per 30 minuti utilizzando DNA di sperma di salmone attivato come modello/primer.

     

    Controllo di qualità

    1.Purezza elettroforetica SDS-PAGE superiore al 98%.

    2.Sensibilità di amplificazione, controllo batch-to-batch, stabilità.

    3.Nessuna attività nucleasica esogena, nessuna contaminazione da endonucleasi o esonucleasi esogena

     

    Istruzioni

    Impostazione della reazione

    Componenti

    Volume (μL)

    Concentrazione finale

    10 × PCR Buffer II (Mg²+ libero)a

    5

    dNTP (10 mM ogni dNTP)

    1

    200μM

    MgCl 25 mM2

    2-8

    1-4 mm

    Superstart Taq DNA polimerasi (5U/μL)

    0,25-0,5

    1,25-2,5 U

    25 × Miscela di primerB 

    2

    Modello

    -

    < 1 μg/reazione

    DDH2O

    A 50

    -

    Appunti:

    1) un.Il tampone non contiene dNTP e Mg²+, aggiungere dNTP e MgCl2durante la preparazione del sistema di reazione.

    2) b.Se utilizzate per qPCR/qRT-PCR, è necessario aggiungere sonde fluorescenti al sistema di reazione.Di solito, una concentrazione finale di primer di 0,2 μM darà buoni risultati;se le prestazioni della reazione sono scarse, la concentrazione del primer può essere regolata nell'intervallo 0,2-1 μM.La concentrazione della sonda è

    3) solitamente ottimizzato nell'intervallo 0,1-0,3 μM.È possibile eseguire esperimenti sul gradiente di concentrazione per trovare la migliore combinazione di primer e sonda.

     

    Protocollo di ciclismo termico

    Processo in due fasi

    Fare un passo

    Temperatura

    Tempo

    Cicli

    Pre-denaturazione

    95 ℃

    1-5 minuti

    1

    Denaturazione

    95 ℃

    10-20 secondi

    35-50

    Ricottura/Estensione

    56-64℃ 

    20-60 secondi

     

    Tquiprocesso a fasi

    Fare un passo

    Temperatura

    Tempo

    Cicli

    Pre-denaturazione

    95 ℃

    1-5 minuti

    1

    Denaturazione

    95 ℃

    10-20 secondi

    35-50

    Ricottura

    56-64℃

    10-30 secondi

    Estensione

    72℃

    10-60 secondi

     

    Appunti

    1.Può adottare 95℃ o 94℃, avvio rapido a caldo di 1~5 minuti.

    2.Il sistema è altamente adattabile, con specificità e sensibilità più elevate.

    3.Nella PCR normale è possibile ottenere una maggiore quantità di prodotto e nella PCR quantitativa a fluorescenza può migliorare la normalizzazione della curva di amplificazione e il valore di fluorescenza del modello con una concentrazione molto bassa.Adatto per l'uso come reagente di rilevamento PCR ad alta sensibilità.

    4.e può essere utilizzato nelle reazioni di amplificazione PCR multiplex.

    5.attività della polimerasi 5′→3′, attività dell'esonucleasi 5′→3′;nessuna attività di esonucleasi 3′→5′;nessuna funzione di correzione di bozze.

    6.Adatto per test qualitativi e quantitativi di PCR e RT-PCR.

    7.L'estremità 3' del prodotto PCR è A, che può essere clonato direttamente in un vettore T.

    8.Il metodo in tre fasi è consigliato per primer con basse temperature di ricottura o per l'amplificazione di frammenti più lunghi di 200 bp.

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