Fosfatasi alcalina (ALP)
Descrizione
La fosfatasi alcalina deriva da un ceppo ricombinante di E. coli che trasporta il gene TAB5.L'enzima catalizza la defosforilazione delle estremità 5' e 3' dei fosfomonoesteri del DNA e dell'RNA.Inoltre, idrolizza il ribosio e i trifosfati desossiribonucleosidici (NTP e dNTP).La fosfatasi alcalina TAB5 agisce sulle estremità sporgenti da 5', rientranti da 5' e smussate.La fosfatasi può essere utilizzata in molte applicazioni di biologia molecolare, come la clonazione o l'etichettatura delle estremità delle sonde per rimuovere le estremità fosforilate del DNA o dell'RNA.Negli esperimenti di clonazione, la defosforilazione impedisce l'autolegatura del DNA plasmidico linearizzato.Può anche degradare i dNTP non incorporati nelle reazioni PCR per preparare un modello per il sequenziamento del DNA.L'enzima viene inattivato completamente e irreversibilmente mediante riscaldamento a 70°C per 5 minuti, rendendo così superflua la rimozione della fosfatasi prima della legatura o dell'etichettatura finale
Utilizzo
1. La fosfatasi alcalina accoppiata a proteine (anticorpi, streptavidina ecc.) può identificare specificamente le molecole bersaglio e può essere utilizzata in ELISA, WB e rilevamento istochimico;
2. La fosfatasi alcalina può essere utilizzata per defosforizzare il terminale 5' del DNA o dell'RNA per prevenire l'auto-collegamento;
3. Il DNA o l'RNA defosforilato sopra possono essere marcati con fosfati radiomarcati (tramite la polinucleotide chinasi T4)
Struttura chimica
Specifica
| Articoli di prova | Specifiche |
| Attività enzimatica | 5U/μL |
| Attività dell'endonucleasi | Non rilevata |
| Attività di esonuucleasi | Non rilevata |
| Attività di scheggiatura | Non rilevata |
| Attività RNasi | Non rilevata |
| DNA dell'E.coli | ≤1 copia/5U |
| Endotossina | LAL-Test, ≤10EU/mg |
| Purezza | ≥95% |
Trasporto e stoccaggio
Trasporti:Ambiente
Magazzinaggio :Conservare a 2-8°C
Ripetizione del test consigliataVita:2 anni
