2×PCR Super Mix (con colorante)
2× PCR Master Mix contiene Taq DNA polimerasi, dNTP e altri componenti richiesti dalla PCR.Il Master Mix è stabile per 3 mesi a 4℃ con i nostri stabilizzanti personalizzati.La soluzione premiscelata è ottimizzata per la PCR convenzionale e pronta per l'uso aggiungendo templato di DNA e primer.I prodotti della PCR possono essere caricati direttamente per l'elettroforesi con colorante blu di bromofenolo precaricato.I prodotti amplificati contengono una protrusione di 3'-dA e possono essere facilmente clonati nel vettore T.La Master Mix 2×PCR semplifica la procedura PCR e riduce la contaminazione.
Condizioni di archiviazione
I prodotti devono essere conservati a -25℃~-15℃ per 2 anni.
Specifiche
| Fedeltà (contro Taq) | 1× |
| Inizio caldo | No |
| Sporgenza | 3'-A |
| Polimerasi | Taq DNA polimerasi |
| Formato della reazione | SuperMix o MasterMix |
| Velocità di reazione | Standard |
| Tipologia di prodotto | Miscela principale PCR (2x) |
Istruzioni
1.Sistema di reazione
| Componenti | Volume(μL) |
| DNA modello | Adatto |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L） | 2 |
| 2× Miscela master PCR | 25 |
| DDH2O | a 50 |
2.Protocollo di amplificazione
| Passaggi del ciclo | Temperatura (°C) | Tempo | Cicli |
| Denaturazione iniziale | 94 | 5 minuti | 1 |
| Denaturazione | 94 | 30 secondi | 35 |
| Ricottura | 50-60 | 30 secondi | |
| Estensione | 72 | 30-60 secondi/KB | |
| Proroga finale | 72 | 10 minuti | 1 |
Nota:
1) Utilizzo del modello: DNA genomico da 50-200 ng;0,1-10 ng di DNA plasmidico.
2)Mg2+concentrazione: questo prodotto contiene 3 mM di MgCl2, adatto per la maggior parte delle reazioni PCR.
3) Temperatura di ricottura: fare riferimento al valore teorico Tm dei primer.La temperatura di ricottura può essere impostata su 2-5℃ inferiore al valore teorico del primer.
4) Tempo di estensione: per l'identificazione molecolare si consigliano 30 sec/kb.Per la clonazione genetica si consigliano 60 sec/kb.
Appunti
1.I prodotti PCR con 2× PCR Master Mix non sono adatti per l'elettroforesi su gel di poliacrilammide.
2.Per la vostra sicurezza e salute, indossate camici da laboratorio e guanti monouso durante il funzionamento.
3.Viene utilizzato SOLO per uso di ricerca!
