RT-LAMP Fluorescente (sfera liofilizzata)
La miscela master fluorescente RT-LAMP (polvere liofilizzata) contiene tampone di reazione, DNA polimerasi Bst e trascrittasi inversa resistente al calore, protettore liofilizzato e colorante fluorescente.Il prodotto è sotto forma di perle liofilizzate e per l'uso è necessario aggiungere solo primer e modelli.
Componente reagente
Master Mix fluorescente RT-LAMP (polvere liofilizzata)
Utilizzo
Per l'amplificazione isotermica del DNA o dell'RNA
Condizioni di archiviazione
Trasportare e conservare a 2~8°C.
Durata di conservazione: 12 mesi.
Protocollo
1. Estrarre il numero corrispondente di sfere liofilizzate in base al numero di test.
2. Preparazione del sistema di reazione
Componente | Dosaggio |
Master mix fluorescente RT-LAMP (Polvere liofilizzata) | 2 perle |
Colorante fluorescente | x µl |
10 × miscela di primer a | 5 µl |
Modelli DNA/RNA b | nμL |
Totale | 50 µl |
Appunti:
1)a.Miscela 10×primer: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2) b.Si consiglia di sciogliere il modello di acido nucleico in acqua DEPC.
Hyasen Biotecnologia Co., Ltd
3) Programma di reazione
Temperatura | Tempo | Cicli |
65 ℃ | anni '60 a | 30 |
Appunti:
1. Raccogli il segnale fluorescente
Appunti
1. La temperatura di reazione può essere ottimizzata tra 62°C e 68°C a seconda del primercondizioni;
2. L'esperimento dovrebbe standardizzare l'operazione, inclusa la preparazione del sistema di reazione,elaborazione e dosaggio dei campioni;
3. Per evitare la contaminazione, si consiglia di preparare il sistema di reazione su un tavolo ultra pulitoe aggiungere modelli alla cappa chimica in altre stanze per evitare interferenze false positive.