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  • BSaI HCP1014A

BsaI


N. cat.:HCP1014A

Confezione: 50μL/250μL/1 ml/10 ml/100 ml

BsaI, un'endonucleasi di restrizione dell'endonucleasi di restrizione IIs, deriva da un E.

Descrizione del prodotto

Dati del prodotto

BsaI, un'endonucleasi di restrizione dell'endonucleasi di restrizione IIs, deriva da un ceppo di E. coli combinante che porta il gene BsaI clonato e modificato da Bacillus stearothermophilus, che ha la stessa specificità dell'enzima nativo e un'attività stellare ridotta.La sua sequenza di riconoscimento e i siti di scissione sono i seguenti:

5'······GGTCTC(N)············3'

3'······CCAGAG(NNNNN)···5'


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  • Prossimo:

  • Componenti

    Tampone BsaI(20U/μL), 10xBsaI

     

    Magazzinaggio

    Conservare a -25℃~-15℃, valido per 1 anno (evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento).

     

    Buffer di archiviazione

    Tris-HCl 10 mM, NaCl 200 mM, DTT 1 mM, EDTA 0,1 mM, albumina ricombinante 200 µg/ml, glicerolo al 50%.(pH 7,4 a 25°C).

     

    Caratteristiche del prodotto

    Alta attività, digestione veloce;

    1. Attività a stella bassa, che garantisce un taglio accurato come “bisturi”;

    2. Senza BSA e senza origine animale.

    Sensibilità alla metilazione

    Metilazione della diga: non sensibile;

    Metilazione del Dcm: compromessa da alcune combinazioni di sovrapposizione;

    Metilazione CpG: bloccata da alcune combinazioni di sovrapposizione.

     

     

    Definizione di unità

    Per unità si intende la quantità di enzima necessaria per digerire 1 µg di DNA di controllo interno in 1 ora a 37°C in un volume di reazione totale di 50 µL.

     

    Controllo di qualità

    Saggio della purezza proteica (SDS-PAGE): La purezza di Bsa I è stata determinata ≥ 95% mediante analisi SDS-PAGE utilizzando il rilevamento Coomassie Blue.

    RNasi:20 U di Bsa I con 1,6 μg di RNA MS2 per 16 ore a 37 ℃ non producono alcuna degradazione, come determinato mediante elettroforesi su gel di agarosio.

    Attività della DNasi non specifica:20 U di BsaI con 1 μg di DNA PhiX174 per 16 ore a 37 ℃ non producono DNA in eccesso, come determinato mediante elettroforesi su gel di agarosio.

    Legatura e ritaglio:Dopo la digestione di 1 μg

    DNA di E.coli:2U di VacciniavirusCapping Enzyme vengono sottoposti a screening per la presenza di DNA genomico di E. coli utilizzando TaqManqPCR con primer specifici per il locus 16S rRNA di E. coli.La contaminazione del DNA genomico di E. coli è ≤1 genoma di E. coli.

    Endotossina batterica:Test LAL, secondo la Farmacopea Cinese edizione IV2020, metodo del test del limite del gel, regola generale (1143).Il contenuto di endotossine batteriche deve essere ≤10 EU/mg.

     

    Sistema e condizioni di reazione

    Componente

    Volume

    BsaI(20 U/μL)

    1μL

    DNA

    1μg

    10 tamponi BsaI

    5μL

    gg H2O

    Fino a 50 µl

    Incubare a 37°C per 15-30 minuti.Inattivazione del calore: 80°C per 20 minuti.

    Il sistema di reazione e le condizioni consigliati possono fornire un effetto di digestione enzimatica relativamente buono, che è solo di riferimento, fare riferimento ai risultati sperimentali per i dettagli.

     

    Applicazioni

    Digestione degli enzimi di restrizioneClonazione rapida.

     

    Note sull'uso

    1.Il volume dell'enzima ≤ 1/10 del volume di reazione.

    2. L'attività stellare può verificarsi quando la concentrazione di glicerolo è superiore al 5%.

    3. Potrebbe verificarsi attività di clivaggio quando il substrato è inferiore al rapporto raccomandato.

     

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