Hotstart Taq DNA polimerasi (5u/ul)
La Taq DNA polimerasi è una DNA polimerasi hot start con doppio blocco da parte di doppi anticorpi. Questo prodotto non solo blocca l'attività della polimerasi 5′→3′ della Taq DNA polimerasi, ma blocca anche l'attività dell'esonucleasi 5′→3′.Il riscaldamento per 30 secondi alla temperatura di pre-denaturazione può inattivare completamente l'anticorpo e rilasciare l'attività della DNA polimerasi e l'attività dell'esonucleasi.La caratteristica di doppio blocco non solo può prevenire efficacemente l'amplificazione non specifica causata dal disadattamento o dal dimero del primer, ma anche inibire efficacemente il declino del segnale di fluorescenza causato dalla degradazione della sonda, in modo da rendere il reagente di rilevamento in vitro più stabile durante il trasporto o l'uso a temperatura ambiente temperatura.
Componenti
Componente | HC1012B (250U) | HC1012B (1000U) | HC1012B (10000U) | HC1012B (25000U) |
Taq DNA polimerasi(5 U/μL) | 50 µl | 200 µl | 2 ml | 5 ml |
Condizioni di conservazione
Il prodotto viene spedito con ghiaccio secco e può essere conservato a -25°C~-15°C per 2 anni.
Specifiche
Polimerasi | Taq DNA polimerasi |
Purezza | ≥ 95% (PAGINA SDS) |
Inizio caldo | Avvio a caldo integrato |
Velocità di reazione | Standard |
Attività di esonucleasi | 5′→3′ |
Istruzioni
Impostazione della reazione
Componenti | Volume (μL) | Concentrazione finale |
2× Buffera | 25 | 1× |
Miscela primer/sondaB | × | 0,1 μmol/L-0,5 μmol/L |
Taq polimerasi Hotstart (5U/μL) | 1.2 | 0,12 U/μL |
Modello del DNAc | × | 0,1-100 ng |
DDH2O | Fino a 50 | - |
Appunti:
1) A seconda della specifica applicazione sperimentale, è necessario preparare il corrispondente tampone di reazione.
2) La quantità di DNA e la concentrazione di sonde o primer sono concentrazioni consigliate.La concentrazione ottimale può essere regolata in base alle specifiche condizioni sperimentali.
Protocollo di ciclismo termico
Fare un passo | Temperatura(°C) | Tempo | Cicli |
Pre-denaturazione | 95 ℃ | 5 minuti | 1 |
Denaturazione | 95 ℃ | 15 secondi | 45 |
Ricottura/Estensione | 60 ℃UN | 30 secondib |
Appunti:
1) La temperatura di reazione viene regolata in base al valore Tm dei primer progettati.
2) Diversi strumenti qPCR necessitano di tempi di acquisizione del segnale di fluorescenza diversi, impostare in base al limite di tempo più breve.
Appunti
Si prega di indossare i DPI necessari, come camice da laboratorio e guanti, per garantire la propria salute e sicurezza!