RNA portante poliA
N. cat.: HC4001A
Il poli A, poliadenilato, è una miscela di 100 ~ 10000 poliadenilati, che viene polimerizzata dalla polinucleotide fosforilasi in vitro.In vivo, poli (a) viene aggiunto al terminale 3 dell'mRNA mediante un enzima per migliorare la stabilità dell'mRNA.Nell'applicazione dell'estrazione dell'acido nucleico, l'aggiunta di poli A al lisato o alla soluzione legante può migliorare la resa di DNA e RNA.Il meccanismodi poli A migliorando la resa in acido nucleico è la seguente:
1. Contatto saturo con adsorbimento superficiale degli articoli.La maggior parte degli articoli in polipropilene presentano elettricità statica sulla superficie, che assorbe gli acidi nucleici.Il carrier RNA può saturarlieffetti di adsorbimento e riducono la perdita di acidi nucleici bersaglio.
2. Inattivare le tracce di nucleasi: nei campioni biologici sono presenti diverse nucleasiambiente.Il poli A può inattivare le tracce di nucleasi nelle fasi di estrazione o conservazionemigliorare la resa e la stabilità degli acidi nucleici target.
3. Coprecipitazione: nella fase di purificazione dell'acido nucleico della precipitazione o del legame mediato da alcol, il poli A può coprecipitarsi con l'acido nucleico target o formare particelle polimeriche permigliorare il recupero.
Condizioni di archiviazione
-20~8℃, la conservazione a secco, la conservazione a lungo termine deve essere collocata a -20℃
Specifica
Numero CAS | 26763-19-9 |
Aspetto | Polvere liofilizzata bianca |
Purezza | 99% |
Peso molecolare | 700-3500 KDa |
Metodo di utilizzo
Prendere una quantità adeguata di polvere liofilizzata, aggiungere acqua trattata con DEPC o una soluzione di sale di guanidinascioglierlo in 0,1-1ug/ul, quindi sottoconfezionarlo e conservarlo a -20°C.
Applicazioni
1. Estrazione del DNA/RNA del virus: l'aggiunta di 1-5ug di RNA trasportatore al lisato può migliorare la resa di RNA/DNA, stabilizzare l'acido nucleico target ed evitare la degradazione dell'acido nucleico purificato durante la conservazione.
2. Nell'estrazione del micro DNA/RNA con il metodo della membrana a colonna (<1ug), l'aggiunta di RNA trasportatore a 1-5ug è utile per migliorare la resa dell'acido nucleico.
3. Nella fase di precipitazione e concentrazione dell'acido nucleico mediata dall'alcol, l'aggiunta di 1-2ug di RNA trasportatore è utile per migliorare il recupero dell'RNA a segmento corto.
4. Nella soluzione di reazione PCR con sonda quantitativa, l'aggiunta di 10-100 ng di RNA trasportatore alla soluzione di reazione è utile per migliorare la sensibilità e ridurre la CTvalore.