DNasi I (senza RNAsi) (2u/ul)
N. cat.: HC4007B
La DNasi I è un'endonucleasi in grado di digerire il DNA a singolo o doppio filamento.Può idrolizzare i legami fosfodiestere per produrre mono- e oligodeossinucleotidi contenenti un gruppo 5'-fosfato e un gruppo 3'-OH.L'intervallo di pH di lavoro ottimale della DNasi I è 7-8.L'attività della DNasi I dipende dal Ca2+e può essere attivato da ioni metallici bivalenti come CO2, Mn2+, Zn2+, ecc. Alla presenza di Mg2+, La DNasi I può scindere casualmente qualsiasi sito del DNA a doppio filamento;Mentre alla presenza di Mn2+, La DNasi I può scindere il DNA a doppio filamento nello stesso sito, formando estremità smussate o appiccicose con 1-2 nucleotidi sporgenti.Può essere utilizzato per l'elaborazione di vari campioni di RNA.
Componenti
| Nome | 1KU | 5KU |
| DNasi I ricombinante (priva di RNasi) | 500 µl | 5×500 µl |
| Tampone di reazione DNasi I (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Condizioni di archiviazione
Questo prodotto deve essere conservato a -25~-15℃ per 2 anni.Si prega di evitare ripetuti congelamenti e scongelamenti.
Istruzioni
Applicato alla rimozione del DNA da campioni di RNA solo come riferimento.
1. Utilizzare provette da centrifuga e puntali per pipette privi di RNasi per preparare il seguente sistema di reazione:
| Componenti | Volume (μL) |
| Tampone di reazione DNasi I (10×) | 1 |
| DNasel ricombinante (privo di RNasi) | 1 |
| RNA | X |
| DdH privo di RNasi2O | Fino a 10 |
2. Le condizioni di reazione sono le seguenti: 37℃, dopo 15-30 minuti, aggiungere una concentrazione finale di soluzione EDTA 2,5 mM e mescolare bene, quindi 65℃ per 10 minuti.Il modello elaborato può essere utilizzato per successivi esperimenti RT-PCR o RT-qPCR, ecc.
Appunti
1. La DNasi l è sensibile alla denaturazione fisica;Durante la miscelazione, capovolgere delicatamente la provetta eagitare bene, non agitare vigorosamente.
2. L'enzima deve essere conservato in un contenitore del ghiaccio o in un bagno di ghiaccio quando viene utilizzato e deve essere conservato a -20 ℃ immediatamente dopo l'uso.
3. Questo prodotto è solo per uso di ricerca.
4. Si prega di operare con camici da laboratorio e guanti monouso, per la vostra sicurezza.
